Metode penelitian bakteriologi: langkah-langkah, tujuan, karakteristik

Studi tentang bakteri adalah signifikansi praktis yang besar bagi individu. Hari ini membuka sejumlah besar prokariota, yang berbeda satu sama lain dalam patogenisitas, ruang lingkup, bentuk, ukuran, jumlah flagela dan parameter lainnya. Untuk mempelajari secara rinci ketegangan diterapkan metode penelitian bakteriologi.

Apakah metode analisis sel bakteri?

Untuk menentukan apakah bakteri patogen, sedang melakukan studi budaya dalam berbagai cara. Di antara mereka:

1. Metode Bacterioscopic.

2. Metode bakteriologis.

3. Metode biologis.

Tuberkulosis mikroskop dan bakteriologis metode penelitian didasarkan pada pekerjaan sel prokariotik analisis biologis yang dibutuhkan untuk menguji dampak dari sel-sel tersebut dalam organisme hidup hewan percobaan. Menurut tingkat manifestasi dari ini atau tanda-tanda lain dari ilmuwan penyakit dapat menyimpulkan ada tidaknya bakteri patogen dalam sampel, serta mereka alami merambat di tubuh hewan untuk budaya mereka dan menggunakan tempat lain.

Metode penelitian bakteriologi berbeda dari smear itu. Dalam analisis pertama menggunakan budaya khusus disiapkan dari prokariota hidup, ketika operasi kedua dilakukan dengan sel-sel mati atau hidup pada slide mikroskop.

Tahapan metode penelitian bakteriologi. mikrobiologi

Prinsip mempelajari sifat-sifat dari kultur bakteri dapat berguna untuk mikrobiologi, ilmuwan yang berangkat untuk menjelajahi sel prokariotik, serta untuk laboratorium, yang bertugas untuk menetapkan bakteri patogen atau non-patogenik, dan kemudian diagnosis pasien.

Metode penelitian bakteri dibagi menjadi tiga tahap:

1. Isolasi bakteri dari sampel asli.

2. Menabur dan budidaya bakteri kultur murni, studi tentang sifat-sifatnya.

3. Sebuah studi rinci tentang sel bakteri.

Tahap pertama

Sebuah sampel atau smear, diambil dari permukaan bebas dari media atau pada pasien. Dengan demikian kita mendapatkan "koktail" dari berbagai jenis bakteri yang harus menabur pada diet. Kadang-kadang adalah mungkin untuk segera mengidentifikasi bakteri yang diperlukan, mengetahui pusat distribusi mereka dari tubuh.

Setelah dua atau tiga hari yang dipilih koloni yang diinginkan dan berlapis pada media padat cawan Petri dengan bantuan lingkaran steril. Dalam berbagai laboratorium bekerja dengan tabung, dimana padat atau cair mungkin media nutrisi. Dan dilakukan metode bakteriologi penelitian di mikrobiologi.

leg kedua

Setelah memperoleh koloni bakteri individu dilakukan secara langsung makro dan Mikroanalisis. Semua parameter yang diukur dari koloni, menentukan warna dan bentuk masing-masing. Seringkali jumlah koloni pada cawan petri, dan kemudian di bahan awal. Hal ini penting dalam analisis bakteri patogen, jumlah yang tergantung pada derajat penyakit.

Metode penelitian bakteriologi 2 langkah yang terdiri dalam mempelajari koloni individu mikroorganisme dapat digabungkan dengan metode biologis analisis bakteri. Lain tujuan dari pekerjaan pada tahap ini - untuk meningkatkan jumlah bahan awal. Hal ini dapat dilakukan dalam medium, dan adalah mungkin untuk melakukan percobaan in vivo pada hidup organisme uji. bakteri patogen akan bertambah banyak, dan sebagai hasilnya darah akan berisi jutaan sel prokariotik. Dari darah yang diambil adalah mudah untuk mempersiapkan bakteri bahan bekerja diperlukan.

Tahap ketiga

Bagian yang paling penting dari studi ini - definisi sifat morfologi, biokimia, toksigenik dan antigenik dari budaya bakteri. Pekerjaan adalah untuk memajukan "pemurnian" budaya pada media nutrisi, serta obat-obatan (sering diwarnai) di bawah mikroskop.

Mengatur keanggotaan bakteri patogen atau oportunistik untuk kelompok taksonomi tertentu, serta untuk menentukan resistensi obat mereka memungkinkan metode penelitian bakteriologi. Tahap 3 - antibiotik, yaitu analisis perilaku sel bakteri dalam kandungan obat di lingkungan ...

Studi tentang resistensi antibiotik budaya sangat penting praktis jika diperlukan untuk mendaftar untuk kebutuhan pasien tertentu, dan yang paling penting, obat yang efektif. Di sini dan dapat membantu metode penelitian bakteriologi.

Apa berkembang biak?

Untuk pengembangan dan reproduksi bakteri harus di media kultur yang telah disiapkan. Konsistensi ini mungkin baik cair atau padat, dan asal - tumbuhan atau hewan.

Persyaratan dasar untuk media nutrisi:

1. Sterility.

2. transparansi maksimum.

3. kinerja optimal keasaman, tekanan osmotik, aktivitas air dan variabel biologis lainnya.

Mendapatkan koloni terisolasi

1. Metode Drygalski. Ini terletak pada kenyataan bahwa loop diterapkan untuk smear bakteri dengan berbagai jenis mikroorganisme. lingkaran ini dilakukan pada cawan petri pertama dengan media nutrisi. Berikutnya, tanpa mengubah loop dengan bahan sisa dilakukan oleh cawan petri kedua dan ketiga. Jadi, koloni terakhir dari sampel bakteri akan menjadi unggulan tidak terlalu ketat, sehingga menyederhanakan kemampuan untuk menemukan yang diperlukan bagi bakteri.

2. Metode Koch. Menggunakan tabung dengan media nutrisi cair. Ada ditempatkan loop atau pipet smear bakteri, setelah itu isi tabung dituangkan ke piring khusus. Agar (atau gelatin) membeku setelah beberapa waktu dan mudah untuk mendeteksi ketebalan koloni sel yang diinginkan. Hal ini penting untuk mulai larut campuran bakteri dalam tabung dengan konsentrasi mikroorganisme tidak sangat besar.

Metode bakteriologis penelitian, langkah-langkah yang didasarkan pada alokasi yang benar dari budaya bakteri, bisa tanpa dua cara untuk menemukan koloni terisolasi.

antibiotikogrammy

Visual, reaksi bakteri terhadap obat dapat dilihat dalam dua cara praktis:

1. Metode cakram kertas.

2. Pembibitan bakteri dan antibiotik pada media cair.

metode kertas cakram membutuhkan budaya mikroorganisme yang tumbuh pada medium nutrisi yang solid. menengah diletakkan beberapa potong kertas bulat, diresapi dengan antibiotik. Jika obat berupaya dengan netralisasi sel bakteri setelah bagian perawatan ini tetap koloni tanpa. Jika reaksi negatif terhadap antibiotik, bakteri akan bertahan.

Dalam kasus menggunakan media nutrisi cair disiapkan beberapa tabung pertama dengan budaya bakteri derajat yang berbeda dari pengenceran. Untuk mereka tabung ditambahkan antibiotik, dan selama hari-hari berikutnya proses interaksi substansi dan mikroorganisme. Pada akhirnya, kami memiliki kualitas antibiotikogrammy yang digunakan untuk menilai efektivitas obat untuk budaya tertentu.

analisis dasar dari masalah

Berikut dirinci tujuan dan tonggak dari metode penelitian bakteriologi.

1. Dapatkan bahan mulai digunakan untuk isolasi koloni bakteri. Ini bisa menjadi swab dari permukaan benda, mukosa atau rongga tubuh manusia, tes darah.

2. Budidaya budaya pada medium padat. 24-48 jam pada cawan Petri dapat ditemukan koloni bakteri dari spesies yang berbeda. Filter dengan kriteria morfologi dan / atau biokimia diperlukan dan diadakan untuk pekerjaan masa depannya.

3. Perbanyakan budaya yang dihasilkan. Metode bakteriologis investigasi dapat didasarkan pada metode mekanik atau biologis untuk meningkatkan jumlah budaya bakteri. Dalam kasus pertama, pekerjaan sedang berjalan dengan media nutrisi padat atau cair, yang dalam inkubator bakteri berkembang biak dan membentuk koloni baru. Metode biologis membutuhkan kondisi alam meningkatkan jumlah bakteri, jadi di sini mikroorganisme hewan laboratorium yang terinfeksi. Setelah beberapa hari dalam sampel darah atau swab dapat menemukan banyak prokariota.

4. Menggunakan budaya dimurnikan. Untuk menentukan posisi taksonomi bakteri, serta afiliasi mereka untuk patogen, perlu untuk melakukan analisis mendalam tentang sel berdasarkan karakteristik morfologi dan biokimia. Dalam studi kelompok mikro-organisme patogen penting untuk mengetahui seberapa efektif tindakan antibiotik.

Itu adalah karakteristik umum dari metode penelitian bakteriologi.

analisis fitur

Aturan utama dari pemeriksaan bakteriologi - adalah sterilitas maksimum. Jika Anda bekerja dengan tabung tes, tanaman dan subkultur bakteri harus dilakukan hanya atas lampu alkohol dipanaskan.

Semua tahapan metode penelitian bakteriologi memerlukan penggunaan loop khusus atau Pasteur pipet. Kedua alat harus pra-perawatan di api lampu semangat. Adapun Pasteur pipet, kemudian segera sebelum panas sterilisasi perlu untuk memutuskan ujung pinset pipet.

Teknik pembenihan bakteri juga memiliki ciri khas tersendiri. Pertama, ketika berlapis pada media padat dilakukan pada permukaan lingkaran agar bakteri. Lingkaran, tentu saja, harus sudah berada di permukaan sampel mikroorganisme. Juga dipraktekkan tanaman ke dalam medium kultur, dalam hal loop atau pipet harus mencapai bagian bawah cawan petri.

Ketika bekerja dengan media cair yang digunakan tabung. Hal ini penting untuk memastikan bahwa cairan tidak menyentuh tepi gelas laboratorium atau gabus dan alat-alat yang digunakan (dropper, engsel), jangan sentuh benda asing dan permukaan.

Nilai metode penelitian biologi

Analisis sampel bakteri memiliki aplikasi praktis. Pertama-tama teknik studi bakteriologis dapat digunakan dalam pengobatan. Sebagai contoh, perlu untuk mempelajari mikroflora pasien dalam rangka membangun diagnosis yang benar, serta untuk mengembangkan program yang tepat pengobatan. Ada membantu antibiogram yang akan menunjukkan aktivitas obat terhadap patogen penyakit.

Analisis bakteri yang digunakan di laboratorium untuk menentukan penyakit berbahaya seperti TBC, kambuh demam atau gonore. Hal ini juga digunakan untuk mempelajari komposisi bakteri amandel, rongga organ.

Studi bakteriologis dapat digunakan untuk menentukan metode polusi. Menurut komposisi kuantitatif dan kualitatif dari smear dari permukaan suatu benda ditentukan oleh tingkat hunian menengah oleh mikroorganisme.