Uji serologis: jenis, penggunaan

diagnosis laboratorium hampir semua penyakit menular didasarkan pada deteksi darah di antibodi pasien, yang diproduksi oleh antigen patogen, metode serologi. Mereka pergi ke dalam praktek kedokteran di akhir abad kesembilan belas - awal abad kedua puluh.

Perkembangan ilmu pengetahuan telah membantu untuk menentukan struktur antigenik mikroba dan formula kimia racun mereka. Hal ini dimungkinkan untuk membuat serum tidak hanya terapi tetapi juga diagnostik. Mereka diperoleh dengan pemberian patogen dilemahkan hewan laboratorium. Setelah beberapa hari merendam kelinci darah atau tikus disiapkan produk yang digunakan untuk identifikasi bakteri atau racun mereka menggunakan tes serologi.

Manifestasi lahiriah dari reaksi ini tergantung pada kondisi formulasi dan keadaan antigen dalam darah pasien. Jika mikroba adalah partikel larut, mereka menetap, segaris, bergerak atau terikat dalam serum. Jika antigen yang larut, tampaknya fenomena netralisasi atau curah hujan.

aglutinasi (PA)

Uji aglutinasi serologi sangat spesifik. Sangat mudah untuk melakukan dan cukup jelas untuk cepat mendeteksi keberadaan antigen dalam serum pasien. Hal ini digunakan untuk menetapkan reaksi Vidal (diagnosis tifus dan paratifoid) dan Weigl (tifus).

Hal ini didasarkan pada interaksi spesifik antara antibodi manusia (atau aglutinin) dan sel-sel mikroba (agglyutenogenami). Berikut interaksi mereka terbentuk partikel yang mengendap. Ini adalah tanda positif. Untuk pengaturan reaksi dapat digunakan agen hidup atau mati mikroba, jamur, protozoa, sel-sel darah dan sel-sel somatik.

Reaksi kimia dibagi menjadi dua tahap:

1. Spesifik antibodi senyawa (AT) dengan antigen (Ag).
2. Non-spesifik - pengendapan konglomerat AG-AT, yaitu pembentukan menggumpalkan tersebut.

Reaksi aglutinasi tidak langsung (TPHA)

Reaksi ini lebih sensitif dari yang sebelumnya. Hal ini digunakan untuk diagnosis penyakit yang disebabkan oleh bakteri, parasit intraseluler, protozoa. Hal ini sangat spesifik yang dapat mendeteksi bahkan konsentrasi yang sangat rendah antibodi.

Untuk formulasi dengan menggunakan sel-sel darah merah dimurnikan domba dan sel-sel darah merah manusia pra-perawatan dengan antibodi atau antigen (itu tergantung pada apa yang lab ingin menemukan). Dalam beberapa kasus, sel darah merah manusia diobati dengan imunoglobulin. respon serologi eritrosit dianggap sah jika curah hujan daripadanya terjadi di bagian bawah tabung. Reaksi positif kita bisa mengatakan ketika sel-sel disusun dalam bentuk payung terbalik, menempati seluruh bagian bawah. Reaksi negatif mencetak gol ketika sel-sel darah merah menetap dalam bentuk kolom atau tombol di tengah bagian bawah.

Reaksi presipitasi (RP)

Reaksi serologis jenis ini berfungsi untuk mengidentifikasi partikel antigen sangat kecil. Ini mungkin, misalnya, protein (atau bagian daripadanya), senyawa protein dengan lipid atau karbohidrat, bagian dari bakteri dan racun mereka.

Sera untuk reaksi diperoleh dengan infestasi buatan hewan, biasanya kelinci. Dalam metode ini, Anda bisa mendapatkan benar-benar ada pencetus serum. Pementasan serologis presipitasi mekanisme serupa tindakan pada aglutinasi. Antibodi yang terkandung dalam mengikat serum terhadap antigen dalam solusi koloid untuk membentuk molekul protein besar, yang disimpan di bagian bawah tabung atau pada substrat (gel). Metode ini dianggap sangat spesifik dan dapat mendeteksi bahkan jumlah jejak substansi.

Digunakan untuk mendiagnosa wabah, tularemia, anthrax, meningitis dan penyakit lainnya. Juga terlibat dalam pemeriksaan forensik.

uji presipitasi gel

Tes serologis dapat dilakukan tidak hanya di media cair, tetapi dalam gel agarosa. Ini disebut metode presipitasi menyebar. Dengan itu, mempelajari komposisi campuran antigen kompleks. Metode ini didasarkan pada kemotaksis antigen antibodi, dan sebaliknya. Gel mereka bergerak terhadap satu sama lain pada kecepatan yang berbeda dan pertemuan untuk membentuk garis presipitasi. Setiap baris - satu set K-AT.

Netralisasi eksotoksin antitoksin (RN)

serum bersifat antitoksin dapat menetralisir eksotoksin yang mikroorganisme menghasilkan. Berdasarkan data ini dan tes serologi. Mikrobiologi menggunakan metode ini untuk titrasi sera, racun dan toxoid, serta aktivitas terapeutik mereka. Kekuatan netralisasi toksin ditentukan oleh unit konvensional - AE.

Selain itu, karena reaksi ini dapat menentukan spesies atau jenis milik eksotoksin. Hal ini digunakan dalam diagnosis tetanus, difteri, botulisme. Penelitian ini dapat dilakukan "pada kaca", dan dalam gel.

Reaksi lisis (RL)

Serum kekebalan tubuh, yang masuk ke dalam tubuh pasien, memiliki, selain fungsi utamanya kekebalan pasif, bahkan dan sifat litik. Hal ini mampu melarutkan agen mikroba, elemen seluler dan asing virus memasuki tubuh pasien. Tergantung pada spesifisitas antibodi termasuk dalam serum terisolasi bactericidin, cytolysins, spirohetoliziny, hemolysins dan lainnya.

Ini antibodi spesifik disebut "pelengkap". Hal ini ditemukan di hampir semua cairan tubuh, memiliki struktur protein kompleks dan sangat sensitif terhadap kenaikan suhu, terguncang, asam dan sinar matahari langsung. Tapi di negara kering mampu mempertahankan sifat litik mereka hingga enam bulan.

Ada beberapa jenis tes serologi jenis ini:

- bacteriolysis;

- hemolisis.

Bacteriolysis dilakukan dengan menggunakan serum darah pasien dan serum imun spesifik dengan kuman hidup. Jika, maka peneliti melihat lisis dari bakteri, dan respon akan dianggap sebagai jumlah yang memadai pelengkap positif hadir dalam darah.

Respon serologis darah kedua adalah bahwa suspensi eritrosit diperlakukan pasien serum yang mengandung hemolysins, yang diaktifkan hanya dengan adanya pujian tertentu. Jika ada satu, maka lab menonton pembubaran sel darah merah. Reaksi ini banyak digunakan dalam kedokteran modern untuk menentukan titer komplemen (yaitu, jumlah terkecil yang memprovokasi lisis sel darah merah) dalam serum darah dan untuk produksi pelengkap assay mengikat. Itu cara ini dilakukan reaksi serologi untuk sifilis - Wasserman.

fiksasi komplemen (RSK)

Reaksi ini digunakan untuk mendeteksi antibodi serum untuk pasien dari agen infeksi serta untuk mengidentifikasi pencetus struktur antigenik nya.

Sampai saat ini kami telah menggambarkan sebuah tes serologi sederhana. RAC dianggap reaksi sulit, karena berinteraksi bukan dua, tapi tiga elemen: antibodi, antigen dan melengkapi. Esensinya terletak pada kenyataan bahwa interaksi antara antibodi dan antigen hanya terjadi di hadapan protein pujian yang teradsorpsi pada permukaan membentuk kompleks K-AT ini.

Sendiri antigen setelah penambahan pelengkap, tunduk pada perubahan substansial, yang menunjukkan kualitas reaksi. Ini mungkin lisis, hemolisis, imobilisasi, bakterisida atau efek bakteriostatik.

Reaksi itu sendiri terjadi dalam dua tahap:

1. Pembentukan antibodi-antigen, yang tidak secara visual peneliti terlihat.
2. Mengubah antigen di bawah tindakan pelengkap. Fase ini biasanya dapat ditelusuri dengan mata telanjang. Jika respon visual tidak terlihat, maka menggunakan sistem indikator tambahan yang memungkinkan untuk mendeteksi perubahan.

sistem indikator

Reaksi ini didasarkan pada pengikatan komplemen. Tabung reaksi jam setelah pengaturan RSK menambahkan eritrosit domba dimurnikan dan hemolitik serum tidak mengandung pelengkap. Jika tabung yang tersisa pelengkap terikat, ia akan bergabung kompleks N-AT yang terbentuk antara sel-sel darah domba dan hemolisin, dan menyebabkan pembubaran mereka. Ini berarti bahwa DGC negatif. Jika sel-sel darah merah tetap utuh, maka, sesuai, reaksi positif.

hemaglutinasi (RHA)

Ada dua hemaglutinasi fundamental berbeda. Salah satu dari mereka - serologi, digunakan untuk menentukan golongan darah. Dalam hal ini eritrosit berinteraksi dengan antibodi.

Dan reaksi kedua tidak terkait dengan serologi, karena sel-sel darah merah bereaksi dengan hemagglutinin diproduksi oleh virus. Karena setiap exciter hanya bertindak atas eritrosit tertentu (ayam, domba, monyet), kita dapat mengasumsikan reaksi ini sempit tertentu.

Jelas respon positif atau negatif, adalah mungkin untuk lokasi sel-sel darah di bagian bawah tabung. Jika mereka mencari menyerupai payung terbalik, maka virus yang diinginkan hadir dalam darah pasien. Dan jika semua sel-sel darah merah dibentuk seperti kolom koin, tidak ada patogen yang tidak diketahui.

Reaksi inhibisi hemaglutinasi (HAI)

Ini reaksi yang sangat spesifik, yang memungkinkan untuk membangun bentuk, jenis virus atau adanya antibodi spesifik dalam serum darah pasien.

Esensinya terletak pada kenyataan bahwa antibodi ditambahkan ke dalam tabung yang berisi materi tes, mencegah pengendapan antigen pada eritrosit, sehingga menghentikan hemaglutinasi. Ini merupakan indikasi kualitatif kehadiran antigen tertentu dalam darah untuk virus yang diinginkan tertentu.

Reaksi imunofluoresensi (RIF)

Reaksi ini didasarkan pada kemampuan untuk mengidentifikasi kompleks dengan AT-AH neon mikroskop setelah pewarna pengobatan flyuorohromnymi. Metode ini mudah digunakan, tidak memerlukan isolasi kultur murni dan membutuhkan sedikit waktu. Hal ini sangat diperlukan untuk diagnosis cepat penyakit menular.

Dalam prakteknya, ini tes serologi dibagi menjadi dua kategori: langsung dan tidak langsung.

Langsung RIF diproduksi antigen yang sebelumnya diproses serum neon. Dan tidak langsung adalah bahwa obat ini pertama diobati dengan diagnosticum konvensional yang terdiri dari antibodi terhadap antigen yang diinginkan dan kemudian kembali diterapkan whey neon, yang khusus untuk protein kompleks K-AT, dan sel-sel mikroba menjadi terlihat dengan mikroskop.