Metode mikrobiologi untuk studi air, tanah dan udara

Mikro-organisme - kecil, sebagian besar bersel tunggal makhluk, yang tersebar luas di alam. Mereka ditemukan di semua media (udara, tanah, air) pada manusia dan hewan, pada tumbuhan.

keanekaragaman kualitatif dan jumlah organisme tergantung terutama pada senyawa gizi. Tetapi juga penting karena kelembaban, suhu, aerasi dan tindakan dari sinar matahari dan faktor lainnya.

природных сред позволяют выявить наличие патогенных микроорганизмов, определить их количество и, в соответствии с полученными результатами, выработать меры по устранению или предупреждению инфекционных заболеваний. Metode untuk media alami sanitasi dan studi mikrobiologi dapat mendeteksi keberadaan patogen dan untuk menentukan jumlah mereka sesuai dengan hasil yang diperoleh, untuk mengembangkan langkah-langkah untuk menghapus atau mencegah penyakit menular. Selain itu, akun kuantitatif diperlukan untuk pemodelan ekosistem dan pengembangan proses alami pemerintahan. . Mari kita mempertimbangkan lebih lanjut apa metode pemeriksaan mikrobiologi.

tanah

Hal ini dianggap oleh para ahli sebagai salah satu rute yang mungkin penularan patologi menular. Dengan sekret pasien manusia atau hewan di patogen tanah menembus. Beberapa dari mereka, khususnya, spora, dapat bertahan dalam tanah untuk waktu yang lama (kadang-kadang selama beberapa dekade). позволяют определить "микробное число" (кол-во микроорганизмов в грамме грунта), а также коли-индекс (количество кишечных палочек). Tanah jatuh patogen infeksi berbahaya seperti seperti tetanus, anthrax, botulisme, dan sebagainya. Metode penelitian sanitasi-mikrobiologis tanah memungkinkan Anda untuk menentukan "mikroba" (jumlah mikroorganisme dalam tanah gram), dan indeks coli (jumlah E. coli) .

analisis tanah: gambaran

следует в первую очередь отнести прямое микроскопирование и посев на плотную питательную среду. Metode untuk pemeriksaan mikrobiologis tanah terutama harus dikaitkan mikroskop dan budaya langsung pada padat media nutrisi. Populasi mikroorganisme dan kelompok mereka yang mendiami tanah, berbeda pada status taksonomi dan fungsi ekologis. Dalam ilmu, mereka bersatu di bawah istilah generik "biota tanah." Primer - habitat sejumlah besar mikroorganisme. Dalam gram tanah hadir dari 1 sampai 10 miliar sel mereka. Dalam lingkungan ini, secara aktif mengambil dekomposisi bahan organik, dengan partisipasi dari berbagai mikroorganisme saprofit.

Studi mikroskopis metode mikrobiologi: langkah-langkah

Analisis media dimulai dengan sampling. Untuk tujuan ini, sebelumnya dikupas dan pisau alkohol parut (sekop dapat digunakan). Setelah itu, persiapan sampel. Langkah selanjutnya - menghitung sel pap bernoda. Pertimbangkan setiap langkah secara terpisah.

contoh

Dalam analisis tanah pertanian cenderung sampel yang diambil dari kedalaman seluruh lapisan. Pertama dihapus 2-3 cm di atas tanah, karena mungkin hadir dalam mikroflora asing. Setelah itu, dengan luas tanah dipelajari mengambil monolit. Panjang masing-masing harus sesuai dengan ketebalan lapisan dari mana Anda ingin sampel.

Di sebidang 100-200 sq. 7-10 m sampel yang dipilih. Bobot masing-masing - urutan 0,5 kg. Sampel harus dicampur secara menyeluruh dalam tas. Kemudian mengambil sampel rata-rata beratnya sekitar 1 kg. Ini harus ditempatkan di perkamen (steril) paket tertutup dalam kantong kain. Sebelum analisis sampel disimpan di lemari es langsung.

Persiapan survei

tanah diaduk dituangkan pada kaca kering. Pra-bersihkan dengan alkohol dan membakar di atas kompor. Dengan tanah spatula dicampur dan diperluas secara merata. Ini adalah wajib untuk menghapus akar dan unsur-unsur asing lainnya. Untuk melakukannya, gunakan pinset. Sebelum pinset operasi dan spatula di atas kompor dinyalakan dan dibiarkan dingin.

Dari berbagai plot tanah didistribusikan pada kaca, yang dipilih porsi kecil. Mereka ditimbang di piring porselen pada skala teknis. является специальная обработка образца. Langkah Metode wajib mikroskopis studi mikrobiologi adalah pengolahan khusus dari sampel. 2 harus dipersiapkan sebelumnya, labu steril. Ukuran mereka tidak boleh melebihi 250 ml. Salah satu termos dituangkan ke dalam 100 ml air keran. Karena dibutuhkan 0,4-0,8 ml sampel cairan dari tanah dan dibasahi untuk pasta. Campuran harus digosok dengan jari atau karet alu selama 5 menit.

Air dari termos pertama ditransfer ke massa tanah labu kosong. Selanjutnya, menggosok punggungnya. Setelah massa ini dipindahkan ke dalam labu dekat api burner. Wadah dengan suspensi tanah terguncang pada shaker selama 5 menit. Setelah itu, hal itu diperbolehkan untuk menetap selama sekitar 30 detik. Hal ini diperlukan untuk memungkinkan partikel besar untuk menetap. Setelah setengah massa menit digunakan untuk mempersiapkan persiapan.

jumlah sel pada smear tetap

, разработанному Виноградским. studi mikroskopis langsung dari tanah dilakukan dengan metode studi mikrobiologi, dikembangkan Vinogradskii. Volume tertentu suspensi dihitung jumlah sel mikroorganisme. Mempelajari Pap tetap dapat menyimpan obat dalam jangka panjang dan melakukan perhitungan setiap saat.

Persiapan obat sebagai berikut. Sebuah jumlah tertentu dari lumpur (biasanya 0,02-0,05 ml) diterapkan dengan mikropipet ke slide. Untuk larutan ini ditambahkan setetes agar-agar (polisakarida agaropectin campuran dan agarosa diekstrak dari ganggang coklat dan merah Laut Hitam), diaduk dengan cepat dan tersebar di area 4-6 persegi. cm. Pap udara kering dan tetap selama 20-30 menit. alkohol (96%). Berikutnya, obat dibasahi dengan air suling dan ditempatkan di p-p karbol eritrosin 20-30 menit.

Setelah pewarnaan, dicuci dan dikeringkan di udara. jumlah sel dilakukan dari lensa perendaman.

Menabur pada media padat

позволяют выявить большое количество микроорганизмов. metode mikroskopis untuk pemeriksaan mikrobiologi dapat mendeteksi sejumlah besar mikroorganisme. Tapi meskipun ini, metode inokulasi adalah yang paling umum dalam praktek. esensinya terdiri dalam pembenihan jumlah obat (suspensi tanah) dalam cawan Petri pada medium padat.

позволяет учитывать не только количество, но и групповой, а в ряде случаев и видовой состав микроскопической флоры. Metode penelitian mikrobiologi memperhitungkan tidak hanya kuantitas tetapi juga kelompok, dan dalam beberapa kasus, dan komposisi spesies flora mikroskopis. Menghitung jumlah koloni yang dihasilkan, biasanya dari bagian bawah cawan petri dalam cahaya yang ditransmisikan. Pada daerah dihitung ditempatkan penanda atau tinta dot.

Analisis air

Mikroflora badan air, sebagai aturan, mencerminkan komposisi mikroba tanah di sekitarnya. имеют особое практическое значение при изучении состояния конкретной экосистемы. Dalam konteks ini, metode analisis sanitasi-mikrobiologi air dan tanah yang penting praktis tertentu dalam studi tentang keadaan ekosistem tertentu. Air segar mengandung, sebagai aturan, kokus, bakteri berbentuk batang.

Anaerob dalam air ditemukan dalam jumlah kecil. Sebagai aturan, mereka berkembang biak di bagian bawah badan air, di lumpur, mengambil bagian dalam proses pemurnian. lautan mikroflora dan laut menguntungkan diwakili halophytic bakteri (halofilik).

Di dalam air, sumur artesis praktis tidak ada mikroorganisme. Hal ini disebabkan kapasitas penyaringan lapisan tanah.

считаются определение микробного числа и коли-титра либо коли-индекса. metode konvensional penelitian air mikrobiologi dianggap definisi indeks jika-mikroba dan coli-titer atau. Indikator pertama mendefinisikan jumlah bakteri dalam 1 ml cairan. Indeks Coli merupakan jumlah coliform hadir dalam satu liter air, dan jika titer - jumlah minimum atau dilusi cair maksimum di mana mereka masih dapat terdeteksi.

Penentuan jumlah mikroba

Metode ini sanitasi pemeriksaan mikrobiologi air adalah sebagai berikut. Dalam 1 ml air ditentukan jumlah anaerob mesofilik dan fakultatif (intermediate) aerob mampu pada daging-pepton agar (media utama) pada 37 deg. siang hari untuk membentuk koloni terlihat pada perbesaran 2-5 p. atau mata telanjang.

является посев. Langkah kunci dari metode analisis mikrobiologi air ditaburkan. Karena setiap sampel ditaburkan minimal 2 volume yang berbeda. Ketika analisis air keran di setiap cangkir terbuat dari 1-0,1 ml cairan murni dan terkontaminasi 0,01-0,001 ml. Untuk inokulasi 0,1 ml atau volume lebih kecil dari cairan diencerkan dengan air suling (steril). Secara konsisten mempersiapkan pengenceran desimal. 1 ml masing-masing dibuat dalam dua cawan petri.

Pemuliaan diisi dengan nutrien agar. Pertama kali harus mencair, dan keren untuk 45 deg. Setelah diaduk, media aktif yang tersisa pada permukaan horizontal untuk pemadatan. Pada 37 derajat. tanaman yang tumbuh sepanjang hari. позволяет учитывать результаты на тех чашках, где количество колоний находится в пределах от 30 до 300. Metode dianggap penelitian air mikrobiologi memperhitungkan hasil piring mereka di mana jumlah koloni di kisaran 30 sampai 300.

udara

Hal ini dianggap sebagai tanah transit untuk mikroorganisme. являются седиментация (оседание) и аспирация. Metode utama studi mikrobiologi ber sedimentasi (pengendapan) dan aspirasi.

lingkungan udara mikroflora yang sewenang-wenang dibagi menjadi variabel dan konstan. Kelompok pertama meliputi ragi, cocci kromogenik, spora-bantalan bacillus coli dan mikroorganisme lainnya yang tahan terhadap pengeringan, paparan cahaya. Perwakilan variabel mikroflora, menembus ke dalam pesawat dari habitat mereka biasa, lama mempertahankan vitalitas mereka.

Di udara kota-kota besar mikroorganisme jauh lebih daripada di lingkungan udara dari daerah pedesaan. Selama laut, hutan sangat sedikit bakteri. pemurnian udara memfasilitasi curah hujan: salju dan hujan. mikroba dalam ruangan jauh lebih daripada di ruang terbuka. Jumlah mereka meningkat di musim dingin dengan tidak adanya ventilasi biasa.

pengendapan

считается простейшим. Metode penelitian mikrobiologi di mikrobiologi dianggap paling sederhana. Hal ini didasarkan pada menetap dari tetesan dan partikel pada permukaan agar-agar dalam cawan Petri terbuka di bawah gravitasi. Metode sedimentasi mungkin tidak akurat menentukan jumlah bakteri di udara. Faktanya adalah bahwa dalam cangkir terbuka untuk menangkap fraksi halus dari partikel debu dan tetesan bakteri cukup sulit. Di permukaan dipertahankan partikel terutama besar.

Metode ini tidak digunakan untuk analisis udara. Lingkungan ini ditandai dengan fluktuasi besar dalam kecepatan aliran udara. Sedimentasi mungkin, bagaimanapun, digunakan dengan tidak adanya perangkat yang lebih canggih atau sumber tenaga listrik.

Menentukan jumlah mikroba dilakukan dengan metode Omelyansky. Sesuai dengan itu, selama 5 menit pada luas permukaan 100 agar persegi. cm mengendap sejumlah bakteri hadir dalam 10 liter udara.

Memesan 535 "Pada penyatuan metode mikrobiologi penyelidikan"

analisis bakteriologis menempati tempat yang penting dalam kegiatan klinis dan laboratorium yang kompleks yang ditujukan untuk diagnosis, pencegahan dan pengobatan berbagai penyakit infeksi. Namun, studi lingkungan, mereka tidak terbatas.

Yang paling penting adalah analisis bakteriologis dari bahan biologis di rumah sakit. Untuk penelitian yang dilakukan di fasilitas kesehatan, peningkatan persyaratan. Tujuan dari Order "Pada penyatuan metode mikrobiologi penyelidikan" adalah untuk meningkatkan analisis bakteriologis, meningkatkan kualitas dan efisiensi diagnostik mikrobiologi.

pemeriksaan mikroskopis dari smear pada wanita

Ini adalah metode utama dari analisis untuk diagnosis infeksi, infeksi menular seksual, dan infeksi oportunistik (bakteri oportunistik).

analisis mikroskopis untuk mengevaluasi komposisi kualitatif dan kuantitatif dari mikroflora, memeriksa kebenaran dari sampling. Sebagai contoh, kehadiran epitel vagina pada swab diambil dari saluran serviks menunjukkan pelanggaran aturan pemilihan sampel biologis.

Dikatakan bahwa pemeriksaan mikrobiologi dalam kasus ini umumnya diikuti oleh beberapa masalah. Mereka berkaitan dengan fakta bahwa pada saluran genital bawah biasanya menyajikan mikroflora beragam yang bervariasi pada usia yang berbeda. Untuk meningkatkan efisiensi penelitian dan telah mengembangkan aturan standar.

Diagnosis infeksi virus

Hal ini dilakukan dengan metode mendeteksi RNA dan DNA patogen. Mereka terutama didasarkan pada penentuan urutan nukleotida dalam materi patologis. Untuk tujuan ini, probe molekuler. Mereka artifisial diproduksi asam nukleat pelengkap (komplementer untuk) asam virus diberi label dengan label radioaktif atau biotin.

Keunikan dari metode ini diulang menyalin fragmen DNA spesifik yang mengandung beberapa ratusan (atau puluhan) nukleotida pasangan. replikasi (menyalin) adalah ekstensi yang mungkin mulai hanya dalam satuan tertentu. primer (primer) yang digunakan untuk membuat mereka. Mereka adalah oligonukleotida disintesis.

PCR diagnostik (polymerase chain reaction) sederhana dalam pelaksanaan. Metode ini memungkinkan Anda untuk cepat mendapatkan hasil dengan menggunakan sejumlah kecil bahan patologis. Menggunakan PCR diagnostik mengidentifikasi akut, kronis dan laten (tersembunyi) infeksi.

Ketika sensitivitas metode ini dianggap lebih disukai. Namun, sistem tes saat ini tidak cukup handal, sehingga diagnosis PCR tidak dapat sepenuhnya menggantikan metode tradisional.